Sinus rétro orbital

Cette technique de prélèvement sanguin au niveau sinus rétro-orbital (ou sinus périorbitaire ou sinus orbitaire postérieur ou plexus veineux de l'orbite), consiste à effectuer  une  ponction  du  sinus  veineux  derrière  le  globe  oculaire.  Ce prélèvement  doit  toujours  être  effectuée  sous  anesthésie  générale et  seulement  sur  une  orbite. Cette méthode peut être utile pour obtenir de bons  échantillons  chez  des  animaux  sans  queue  comme  les  hamsters  ou  chez des  souris quand le volume requis est plus important que ce qui peut être prélevé au niveau la veine caudale. 

Cependant, cette technique est délicate et impressionnante. Le risque d'entraîner des conséquences graves chez l'animal est élevé en cas de gestes mal contrôlés. Aussi ne devrait-elle effectué que par des personnes compétentes.
 

Méthodologie :

• Préparer le plan de travail (nettoyage de la paillasse, matériel, etc.).
• Brancher l’appareil à anesthésie, vérifier que la boîte à anesthésie est hermétique et y placer un morceau d’essuie-tout.
• Allumer le compresseur, régler l’arrivage d’air à 0.8 et régler l’isofluorane à 2.5.
• Déposer dans la boîte à anesthésie la ou les souris à prélever.
• Attendre que l’anesthésie fasse effet (sédation physique de l’animal).
• Prendre la souris de la boîte à anesthésie et la positionner  sur le côté et veiller à ce qu’elle ait le museau dans le tube d’anesthésie pour ne pas qu’elle se réveille.
• Procéder au prélèvement rétro-orbital avec une pipette Pasteur (avec anticoagulant).

Le prélèvement rétro-orbital s’effectue en écartant la paupière puis à exorbiter par un étirement de la paupière supérieure de manière à récupérer le sang. Puis implanter la pipette Pasteur remplie à 4% du volume à prélever d’anticoagulant, au coin de l’œil, la faire délicatement tourner dans ses doigts pour provoquer une légère irritation de la veine et ainsi récupérer le sang. Dès que le prélèvement est fini, refermer délicatement l’œil en resserrant les paupières. Le sang est déposé dans un tube Eppendorf (ou des microvettes aliquotées d’EDTA selon la manipulation) puis réfrigéré à 4°C dans les minutes suivant le prélèvement.
Il faut ensuite nettoyer l’oeil avec un papier imbibé d’eau l’œil en tapotant légèrement. Replacer ensuite la souris dans une cage propre. Vérifier qu’elle se réveille correctement et qu’aune anomalie n’est survenue suite à l’anesthésie avant de remettre la cage sur le portoir.

Pour les suites de la manipulation, il est possible de garder le sang total ou de le centrifuger pour en obtenir, le plasma ou le sérum. Partant de cet échantillon, on peut réaliser une étude hématologique par exemple grâce à des plateformes spécialisées : service de génotypage ou autre analyses spécifiques.